摘 要

明：（1）苹果酸处理组不同程度缓解了铝胁迫对喜树生长的抑制作用。与同期的

1000mg/L铝胁迫组相比，苹果酸处理的苗高，根长和根茎叶喜树植株鲜重相对较高，

外观态观察的结果也表明了苹果酸对喜树幼苗铝胁迫有缓解作用，其中以0.5mmol/L

的苹果酸处理的效果最好。（2）尽管各处理的保护酶活性（SOD,POD,和CAT、GR）、叶

绿素含量、GSH含量比对照组低，但与同期1000mg/L 铝胁迫组相比，苹果酸处理的

喜树叶和根系相对完整， SOD,POD,和CAT、GR活性、叶绿素含量、GSH含量都1000mg/L

的铝处理得到不同程度提高，其中以1mmol/L 的苹果酸处理的效果最好，而MDA的含

量有不同程度降低，说明苹果酸对Al胁迫有一定的缓解作用,其中以0.5mmol/L的苹

果酸处理的效果最好。

关键词：喜树幼苗； 铝胁迫；缓解作用；苹果酸

Effect of Malic Acid on seedlings of Camptotheca acuminata under aluminum treatment

Abstract: The Effect of Malic Acid on seedlings of Camptotheca acuminata under

aluminum treatment was studied. The result was that：

(1) The growth of Camptotheca acuminata seedligns under Malic acid and 1000mg/L aluminum treatment was better than that of in 1000mg/Laluminum treatment.The length of roots and stems and fresh weight in seedlings under Malic acid and 1000mg/Laluminum treatment were higher than that of in 1000mg/Laluminum treatment, The best treatment effect was 0.5mmol/L of Malic acid and 1000mg/L aluminum treatment.

(2) The protective enzyme activity (SOD, POD and CAT) and the content of chlorophyll and GSH were decreased in Malic acid and aluminum mix treatment and 1000mg/L aluminum alone treatment. But these indications under Malic acid and 1000mg/L aluminum treatment were increased comparatively with under 1000mg/L aluminum treatment ,the content of MDA was decreased comparatively with under 1000mg/L aluminum.

These result shouwed Malic Acid could relievie the oxidative stress of aluminum induction.

Keywords: Camptotheca acuminata ; Aluminum stress; relievie effect; malic acid

目 录

1.前 言 6

1.1喜树资源 6

1.2喜树及有机酸对铝胁迫缓解作用研究过程存在的问题 7

1.3研究意义 7

2材料与方法 7

2.1材料来源及处理方法 7

2.2生长生理指标测定 8

2.2.1生长指标的测定 8

2.2.2生理生化指标测定 9

3.结果与分析 11

3.1苹果酸对喜树铝胁迫下生物量的影响 11

3.2苹果酸对喜树铝胁迫下根长，苗高，侧根数，叶片数的影响 12

3.3苹果酸对喜树铝胁迫下叶绿素含量的影响 13

3.4苹果酸对喜树铝胁迫下保护酶活性和丙二醛（MDA）含量的影响 14

3.4.1苹果酸对喜树超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响 14

3.4.2苹果酸对喜树超氧化物歧化酶（POD）活性的影响 14

3.4.3苹果酸对喜树过氧化氢酶（CAT）的活性的影响 15

3.4.4苹果酸对喜树铝胁迫下丙二醛（MDA）含量的影响 16

2.4.5苹果酸对喜树铝胁迫下还原型谷胱甘肽（GSH）含量的影响 17

2.4.6苹果酸对喜树铝胁迫下还原型抗坏血酸(AsA-POD)含量的影响 18

3.4.7苹果酸对喜树铝胁迫下谷胱甘肽还原酶（GR）活性的影响 18

4.结论与讨论 19

5.致谢 20

参考文献： 21

1.前 言

1.1喜树资源

喜树(Camptotheca acuminate Decaisne) 别名水桐树、千张树等。为蓝果树科喜树属植物，是我国特有树种，1999年经国务院批准列为Ⅱ级国家重点保护野生植物^[1]。喜树高达20~25米，树干通直，树皮灰色至灰黑色，单叶互生，椭圆状卵形或椭圆形，先端渐尖或锐尖，全缘或微波状，花单性同株，聚成头状花序;雌花序顶生，雄花序腋生，有窄翅，顶端有宿存花序，成熟时褐色。其干形通直、树姿优美，可作园林绿化观赏树种，是我国阔叶树的珍品之一，因发现其含有抗癌药物喜树碱而备受关注^[2-3]，苗木需求日益增加。

喜树枝叶所含营养元素丰富.据分析，干叶含氮2.62%，磷0.51%、钾2.56%。每500kg干叶的肥分相当于磷酸钱65.skg、过磷酸钙12.75kg、硫酸钾25.skg。如与其它树种的叶相比，喜树的枝叶也是较好的绿肥树种。并且喜树对有害气体如二氧化硫、氟化氢、氮氧化物的抗性较强^[4]。

喜树材质轻软坚韧，干燥容易，速度快，不翘裂;但不耐腐，容易感染蓝变色菌;喜树木材切削容易，切面光滑，且花纹也较美观，油漆后光亮性也较好，因此，喜树木材可作室内装修用的装饰条。另外，喜树木材又是农具、包装、造纸、火柴杆、胶合板等工业原料。

喜树的果实中含有喜树碱（Camptothecin，CPT）。研究证明，喜树碱可攻击肿瘤细胞，最终导致肿瘤细胞死亡，是理想的抗癌药物^[5-8]。因此，喜树碱对胃癌、直肠癌、膀胱癌等多种癌症和艾滋病有较好的疗效，对慢性粒细胞白血病也有疗效作用。喜树碱在临床上广泛用于肝癌、胃肠肿瘤、食管癌、肺癌、白血病的治疗^[9-12]。目前，喜树碱已设计合成十几种新化合物，有多种已作为药品上市，有的正处于临床阶段^[13-14]。

1.2喜树及有机酸对铝胁迫缓解作用研究过程存在的问题

生长发育及栽培技术: 国内外有关喜树长生发至目前为止报道比较少。尽管国外自1966年至今一行喜树碱及其类似物的研究开发，并取得了可喜的成就，但喜树碱资源问题亟待解决。国内对喜树碱及其类似物的少，在喜树生长发育及栽培技术方面更是缺乏系统的。

生理生化方面: 国内外的研究大多局限于铝胁迫下有机酸的分泌及解毒等方面，而对有机酸例如苹果酸对果酸对喜树幼苗铝胁迫的缓解效应等尚无报道。

1.3研究意义

近年来，全球环境的不断恶化，使世界范围内的酸雨日趋增多。酸雨的频繁沉降，加速了土壤酸化，导致了土壤中铝的大量活化，产生对植物有毒性的离子形态Al3 ，直接危害植物生长，降低低酸性土壤上植物的生产力^[15-18]。铝毒害已成为酸性土壤限制植物生长的最主要问题之一^[19-20]。 本课题通过添加不同浓度苹果酸，研究其对铝胁迫下喜树幼苗的生长及生理代谢的影响，筛选出适宜的浓度，找到缓解铝对植物的胁迫作用的可行措施，土壤改良、喜树的良种选育，抗性的优树筛选，大面积的繁殖培育提供理论参考。

2材料与方法

2.1材料来源及处理方法

喜树种子于去年12月中旬采于南京林业大学主楼前，采集后置于风口处吹干，今年2月下旬选取外观形态一致且较好的约4000粒种子，先用自来水洗净﹑浸泡，两个小时后用HgCl₂浸泡30min，后用自来水洗净，浸泡，放置在26℃恒温箱中24h。10d以后，将已发芽的喜树幼苗置于蛭石中培养，定期浇水，至子叶展开后，喷施1/4Hoagland营养液培养，4月30日移至纸杯中水培，选取长势基本一致的喜树幼苗作为实验材料，并分组进行处理。每组四盒，每盒八到十棵苗，大小均匀分配。分为四组：