摘 要

1. 在1000mg/L (AlCl₃.6H₂O)的胁迫下喜树幼苗根系的干重、叶片叶绿素含

量下降，添加AsA可提高根系的干重、叶片叶绿素含量，0.5mmol/L的缓解效果较1.0mmol/LAsA更明显。（2）添加AsA可提高喜树叶中POD活性、根中GSH含量、AsA含量和叶中DAsA含量，0.5mmol/L AsA比1.0mmol/LAsA处理效果好。（3）根、叶中的SOD活性、AsA-POD活性与有1000mg/L Al处理相比有所下降。添加AsA能够部分缓解铝对喜树幼苗的氧化胁迫,从而维持喜树幼苗的生长。

关键词：喜树幼苗； 铝胁迫；外源AsA

Effect of Ascorbic acid on Camptotheca acuminata seedling growth under Aluminium stress

Abstract: The effect of Ascorbic acid on seedling of Camptotheca acuminata growth under Al stress was studied. The results show that:

(1)The drought weight of roots and content of chlorophyll decreased under 1000mg/L AlCl₃.6H₂O treatment, but these indexes under AsA treatment increased than that of under 1000mg/L Al treatment. It showed that the effect of 0.5 mmol·L^-1 AsA treatment was better than thant of 0.5 mmol·L^-1 AsA treatment . (2)The activity POD in leaves and content of GSH，AsA in roots increased more significantly

under AsA treatment than that of 1000mg/L Al treatment and control.

(3)The AsA-POD activity，SOD activity dencreased under AsA treatment than that of 1000mg/L Al treatment.

These results showed Ascorbic acid could alleviate the stress of Al induction, the effects 0.5mmol·L^-1 Ascorbic acid treatment than 1.0 mmol·L^-1 Ascorbic acid treatment.

Key words: Camptotheca acuminata seedlings；aluminum stress；

ascorbic acid

缩略词表

缩写词 中文名称 英文名称

SOD 超氧歧化酶 Superoxide dismutase

POD 过氧化物酶 Peroxidase

CAT 过氧化氢酶 Catalase

MDA 丙二醛 Malondialdehyde

GSH 谷胱甘肽 Glutathione

AsA-POD 抗坏血酸过氧化物酶 Ascorbate Peroxidase

AsA 抗坏血酸 Ascorbicac

目 录

前 言 1

1.喜树的应用现状和前景 1

2.国内外对植物铝胁迫的研究现状及进展 1

3.本研究的目的和意义 2

1.材料与方法 2

1.1材料来源 2

1.2.材料处理 2

1.3生长生理指标测定 3

1.3.1叶绿素含量的测定： 3

1.3.2超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定 3

1.3.3过氧化物酶（POD）活性的测定 4

1.3.4还原型谷胱甘肽（GSH）含量的测定 4

1.3.5抗坏血酸过氧化物酶（AsA-POD）活性的测定 5

1.3.6 AsA含量的测定 5

2. 结果与分析 6

2.1 AsA对铝胁迫下喜树幼苗鲜重的影响 6

2.2 AsA对铝胁迫下喜树幼苗叶绿素的影响 7

2.3 AsA对铝胁迫下喜树幼苗过氧化物酶含量的影响 8

2.4 AsA对铝胁迫下喜树幼苗超氧歧化酶含量的影响 9

2.5 AsA对铝胁迫下喜树幼苗GSH含量的影响 9

2.6 AsA对铝胁迫下喜树幼苗AsA-POD活性的影响 10

2.7 AsA对铝胁迫下喜树幼苗AsA含量的影响 11

2.8 AsA对铝胁迫下喜树幼苗DAsA含量的影响 12

3.讨论与结论 13

3.1讨论 13

3.1.1 AsA对铝胁迫下的喜树幼苗的鲜重和叶绿素的影响 14

3.1.2 AsA对铝胁迫下的喜树幼苗的保护酶的影响 14

3.1.3 AsA对铝胁迫下的喜树幼苗抗氧化相关小分子物质的影响 14

3.2 结论 15

致 谢 16

参考文献 17

附表 18

前 言

1.喜树的应用现状和前景

喜树（Camptotheca acuminata Decne.）为蓝果树科喜树属植物，是我国特有树种，主要分布于长江流域及西南各省^{[ 1 ]}。1999年经国务院批准列为Ⅱ级国家重点保护野生植物^［2］，因含有抗癌药物喜树碱，已成为继红豆杉之后第二个重要的木本抗癌药用植物，已成为世界性热门研究课题苗木需求日益增加^［3~4］。与其它树种的叶相比,喜树的枝叶是较好的绿肥树种^［5］。喜树木材浅黄褐色，材质轻软，结细密，可作为建筑、家俱用材，还可作造纸、火柴杆等料。同时也是优良的观赏和造林树种。此外,喜树对二氧化硫、氟化氢等有害气体抗性较强,为环境保护和环境检测提供理论基础。

2.国内外对植物铝胁迫的研究现状及进展

铝(Aluminum, Al)是土壤中最丰富的金属元素。在碱性或中性土壤中， 铝主要以氧化物或硅酸盐沉淀物的形式存在，对植物和环境无毒；而在酸性土壤(pH＜5)中， 结合态的铝变为可溶而进入土壤溶液， 对大多数植物产生毒害^[6~7]。 当土壤中的单体铝的活度达到 mM 级别时， 就会影响许多植物根系的生长^[8]。铝毒被认为是酸性土壤或酸化土壤上作物生长最重要的限制因素^［9~10］。在过去的十多年里,在植物耐铝机理的研究中已经取得了突破性的进展。众多生理学的研究表明有机酸分泌是一种重要的耐铝机理,但却不是唯一的机理。分子生物学在植物铝毒和耐铝机理研究中的应用,为我们的研究开辟了全新的领域。

虽然对植物抗铝机制进行了许多研究,但由于铝复杂的物理化学特性,缺乏可靠敏感测定生物样品中铝含量方法,难以进行显微定位,加上铝在自然界无所不在造成样品分析和试验过程中的污染,因而对植物抗铝机制的认识仍然有限,多数只是停留在推理假设阶段,然而许多事实表明在植物体内存在多种抗性机制,我们有理由相信随着研究的不断深入,对植物的抗铝机制尤其是内在机制及分子基础会最终得到阐明。

3.本研究的目的和意义

目前对喜树的研究大多集中于对喜树碱产量、喜树碱定位方面，而对其生态特性以及与环境的相互关系研究甚少^［11~12］。喜树分布在南亚热带、中亚热带半干燥或半湿润的酸性土壤地区，研究喜树的耐铝性对筛选优良的品种尤为必要。

1.材料与方法

1.1材料来源

2010年12月中旬从南京林业大学主楼处采集种子，将种子阴干后于荫凉干燥后贮藏。

1.2.材料处理

2011年2月下旬选取上述种子中饱满且大小均匀的4000粒种子，先用自来水洗净,经0.1% HgCl₂溶液消毒 30 min 后，用蒸馏水冲洗干净并浸种，放入 26 ℃恒温培养箱中 24 h 后，用1/4Hoagland营养液进行水培育苗处理40天，待喜树种子发芽并且根叶均长出。选取长势基本一致的喜树幼苗作为实验材料。