摘 要

以水稻日本晴（Oryza sativa subsp. japonica ‘Nipponbare’）为实验内标，用流式细胞术对花楸属的6种植物进行基因组大小的测定并进行倍性分析。结果显示：西南花楸Sorbus rehderiana Koehne、陕甘花楸Sorbus koehneana C. K. Schneider、维西花楸Sorbus monbeigii (Cardot) Balakr、巨叶花楸Sorbus harrowiana (Balf. f. amp; W W Smith) Rehd、多对花楸Sorbus multijuga Koehne、纤细花楸Sorbus filipes Handel-Mazzetti的2c均值±标准差分别为： 1.459±0.008pg、1.553±0.02pg、1.534±0.077pg、1.426±0.018pg、1.465±0.03pg和2.784±0.045pg；通过C值库花楸属植物不同倍性2C值的变异范围比对，可推断纤细花楸为四倍体，其余均为二倍体。实验结果丰富了花楸属植物的C值库，为中国花楸属复叶组的倍性研究进行了补充，为花楸属的细胞生物学研究、基因组学的研究和种质资源的研究提供了参考依据。

关键词：花楸属；流式细胞术；基因组大小；倍性

Ploidy investigation of six species of Sorbus L. by flow cytometry

ABSTRACT

In this experiment,the C-value and ploidy of six species of Sorbus L. was estimated by flow cytometry using Oryza sativa subsp. japonica 'Nipponbare' as the internal standard．The 2c-value±standard deviation of Sorbus rehderiana Koehne、Sorbus koehneana C. K. Schneider、Sorbus monbeigii (Cardot) Balakr、Sorbus harrowiana (Balf. f. amp; W W Smith) Rehd、Sorbus multijuga Koehne、and Sorbus filipes Handel-Mazzetti were： 1.459±0.008pg、1.553±0.02pg、1.534±0.077pg、1.426±0.018pg、1.465±0.03pg and 2.784±0.045pg . It is concluded that Sorbus filipes Handel-Mazzetti is tetraploid，the others are all diploid. The experimental results enriched the database of C-value of Sorbus L , supplemented the ploidy study of Section Sorbus, and provided the reference basis for the cell biology research, genomics research and germplasm research .

Key words：Sorbus L.；Flow cytometry；C-value；Ploidy

目 录

1 花楸属研究背景 1

1.1 花楸属简介 1

1.2 花楸属研究概况 1

2 倍性鉴定与流式细胞术 3

2.1 倍性鉴定研究概况 3

2.2 流式细胞术的研究进展 3

2.2.1 基于FCM的植物C值测定进展 4

2.2.2 基于FCM的植物倍性测定进展 5

3 材料与方法 7

3.1 实验材料 7

3.2 实验方法 7

3.2.1 细胞核悬浮液的制备和DNA的染色 7

3.2.2 流式细胞仪检测 7

3.2.3 统计分析 7

4 结果与分析 9

4.1 西南花楸的基因组大小及倍性分析 9

4.1.1 西南花楸的概况 9

4.1.2 基因组大小及倍性分析 9

4.2 陕甘花楸的基因组大小及倍性分析 10

4.2.1 陕甘花楸的概况 10

4.2.2 基因组大小及倍性分析 10

4.3 巨叶花楸的基因组大小及倍性分析 11

4.3.1 巨叶花楸的概况 11

4.3.2 基因组大小及倍性分析 12

4.4 维西花楸的基因组大小及倍性分析 13

4.4.1 维西花楸的概况 13

4.4.2 基因组大小及倍性分析 13

4.5 纤细花楸的基因组大小及倍性分析 14

4.5.1 纤细花楸的概况 14

4.5.2 基因组大小及倍性分析 14

4.6 多对花楸的基因组大小及倍性分析 15

4.6.1 多对花楸的概况 15

4.6.2 基因组大小及倍性分析 15

5 讨论 17

致 谢 19

参考文献 20

1 花楸属研究背景

1.1 花楸属简介

花楸属( Sorbus L.)是蔷薇科(Rosaceae)苹果亚科(Maloideae)下面的一个属，多为落叶乔木或灌木^[1]。全世界大约有100种，广泛分布于亚洲、欧洲和北美的温带地区;中国有67种（43个为特有种）^[2]。该属中复叶组Section Sorbus植物奇数羽状复叶，叶片有锯齿，稀近全缘；心皮2-4，稀5，大部分与花托合生，罕为全部合生；花柱2-4，稀5，常离生；果实上有宿存萼片。复叶组下又分8个系，分别为西南系、天山系、矮生系、百华系、两色系、梯叶系、卷边系和多对系^[1]。

花楸属植物因具备较强的园林观赏、经济价值和食用价值而受到科研工作者的普遍关注。该属植物花序密集，白花如雪，秋季红色、黄色或白色的果实挂满枝头可供观赏。有些植物种类果实糖分与维生素充足，可用来做果酱果糕，也可以用来酿酒^[1]。有些果实中富含甾醇类、联苯类、有机酸类、酚类、黄酮类、萜类和可溶性糖等成分，具有很强的药理作用，可以抑菌、抗氧化、止咳平喘等^[3]。有些种类还可用作果树育种。木材可作器物；枝皮含单宁，可以用在鞣皮工业中；嫩枝和叶可以作饲料用；种子含脂肪和苦杏仁素，可以用来供制肥皂或使用在医药工业^[1]。

1.2 花楸属研究概况

花楸属是蔷薇科苹果亚科中种数比较多的一个属。该属植物性状变异较大，并且具有杂交无融合生殖的现象。Robertson^[4]认为杂交和多倍化是驱动花楸属进化和新物种产生的两大主要因素。杂交的内在障碍最初很少，但由于空间隔离和物候因素而逐渐发展^[5]。多倍体情况可能首先发生在亚洲，后在北半球周围传播^[5]。由于杂交，多倍体和无融合生殖的结合，花楸属被认为是欧洲植物中分类学上最复杂的属之一^[6]。

1974年俞德浚系统地研究了中国的花楸属植物，其编写的中文版《中国植物志》（第三十六卷）收录的种有55种10变种。此属分为 3个组14个系，主要将复叶的植物置于复叶组Section Sorbus，将单叶的植物分为两个组，即萼片宿存的组Section Aria和萼片脱落的组Section Micromeles^[1]。1990年，Phipps^[7]等汇编和综合多种出版物，总结出了相对较完整的苹果亚科下的物种清单。后来学者又陆续发现并收录了许多花楸新种,陆玲娣^[8]在2000年发表的中国蔷薇科一些属的种类修订中新添了少叶花楸Sorbus hupehensis var. paucijuga  (D. K. Zang amp; P. C. Huang) L. T. Lu ，枥叶花楸Sorbus yunnanensis  L. T. Lu ，少脉冠萼花楸Sorbus coronata var. ambrozyana  (C. K. Schneider) L. T. Lu。以上可以看出，花楸属的一些种的系统地位还是很不稳定的，需要做进一步的研究。