摘 要

：随着各国大力提倡绿色食品，对合成色素使用的限制越来越多，作为天然色素的乌饭树叶色素在食品工业上的应用越来越受到重视。本文对乌饭树叶黑色素的抗氧化活性进行了研究，测定了乌饭树叶黑色素还原力、总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除超氧阴离子能力和清除羟自由基能力。结果表明，乌饭树叶提取物具有较好的抗氧化能力，

当浓度同为1.0mg/ml时，乌饭树叶提取物的还原力、总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除超氧阴离子能力和清除羟自由基能力分别为0.474、7.394U、90.5%、185.55U和36.75 U。

关键词：乌饭树叶；黑色素；抗氧化；还原力；清除自由基能力

Study on antioxidant activity of the black pigment from the leaves of Vaccinium bracteatum Thunb

Abstract: The more green foods are promoted, the more the uses of synthetic pigments are limited. As a natural pigment, Vaccinium bracteatum Thunb pigment has been extensively studied. In this paper, the antioxidant activity of Vaccinium bracteatum Thunb pigment was studied. It determined the extracts reducing power ,total antioxidant capacity ,scavenging DPPH free radical ability, inhibition of lipid peroxidation ability, scavenging superoxide ability and scavenging hydroxyl radicals ability. The results showed that the extracts have well antioxidant ability. The concentration as 1.0mg/ml, the extracts from the leaves reducing power, total antioxidant capacity, scavenging DPPH free radical ability, scavenging superoxide ability and scavenging hydroxyl radicals ability is 0.474, 7.394U, 90.5%, 185.55U and 36.75U.

Keywords：Vaccinium bracteatum thumb; black pigment; antioxidant; reducing power; scavenging free radical ability

目 录

1 前 言 1

1.1 黑色素研究进展 1

1.1.1 黑色素的种类 1

1.1.2 黑色素的生物功能 1

1.1.3 黑色素的应用 2

1.2 抗氧化活性 2

1.2.1 抗氧化剂 2

1.2.2 抗氧化剂提取方法 3

1.2.3 抗氧化能力测定方法 4

1.3 乌饭树研究进展 5

1.3.1 乌饭树简介 5

1.3.2 乌饭树叶黑色素的主要成分 5

1.3.3 乌饭树叶黑色素抗氧化活性研究现状 6

1.4 本研究的目的和意义 6

2 材料与方法 8

2.1 实验材料 8

2.2 主要实验试剂 8

2.3 主要仪器与设备 8

2.4 实验方法 9

2.4.1 乌饭树叶黑色素的制备 9

2.4.2 乌饭树叶黑色素溶液的配制 9

2.4.3 乌饭树叶黑色素抗氧化活性的测定 9

2.4.4 乌饭树叶黑色素组分分析 11

2.5 数据的处理 11

3 结果与讨论 12

3.1 乌饭树叶黑色素的还原力 12

3.2 乌饭树叶黑色素的总抗氧化能力 12

3.3 乌饭树叶黑色素清除DPPH自由基能力 13

3.4 乌饭树叶黑色素的清除超氧阴离子能力 13

3.5 乌饭树叶黑色素的清除羟自由基能力 14

3.6 乌饭树叶黑色素液相分析 14

4 结 论 16

致 谢 17

参考文献 18

1 前 言

在自然界中，黑色物质是一类重要的物质，它们在生物圈、岩石圈、水圈、大气圈以及宇宙星际到处都有。黑色素（melanin）就是存在于生物圈中的黑色物质，是广泛分布在动物、高等植物和微生物体内的一类色素家族。

黑色素这个术语（来源于μελανοσ，melanos，希腊语的黑色）是19世纪早期的解剖学家在研究人种差异的化学基础时被使用的。黑色素是一类结构复杂多样的酚类或吲哚类生物大分子色素的总称。由于现今的生物化学和生物物理学的技术无法对这类生物大分子提供一个化学结构式，因此黑色素尚无一个严格的定义。黑色素按颜料来定义的化学标准包括黑色，通常不溶于水和常见的有机溶剂，可被氧化剂漂白以及阻抗浓酸降解；按高分子定义的另一个标准是它们的自由基特性。黑色素通常为非均匀性的，它们的组成不仅与单体单元有关，这些单体单元不尽相同，而且还与其聚合过程中的环境条件有关。由于黑色素在自然界中广泛存在，及其在生理学甚至社会学上的重要性，正在并将继续得到广泛而深入地研究。

1.1 黑色素研究进展

1.1.1 黑色素的种类

按照意大利化学家Nicolaus^[20]的观点，可将黑色素分成真黑色素、棕黑色素和异黑色素三类：

（1）真黑色素（eumelanins）：主要是呈黑色或棕色的含氮色素，不含硫原子，由酪氨酸、二羟基苯丙氨酸(多巴)、多巴胺、酪胺等氧化聚合而成；

（2）棕黑色素（phaeomelanins）：颜色较真黑色素浅，含氮和硫原子，常呈棕色、红色甚至黄色，是由酪氨酸经上述同样路径合成而来，其中有半胱氨酸或谷胱甘肽的参与；

（3）异黑色素（allomelanins），常呈黑色或棕色，主要存在于植物和微生物中，是在多酚氧化酶（polyphenol oxidase）存在下通过多酚的氧化聚合形成的。

1.1.2 黑色素的生物功能

由于黑色素具有的特殊的结构和性质，因此，除了作为色素外，它还具有许多种生物功能，概括起来主要有以下几个方面^[1]。

第一，为生物体提供结构性强度。黑色素通过与蛋白质交联加固结构，为生物提供结构性强度并保护蛋白质不被降解。一些植物种子荚果和昆虫表皮以及受伤的香蕉皮等，当它们黑化后就变得坚硬起来。孢子壁、附着枝、子囊壳和菌核等许多真菌结构通过黑化作用同样可以提高它们的抗张强度。在真菌病原体中，附着器和附着枝的黑色素限制细胞壁的渗透性，使细胞产生膨胀压力，从而通过入侵宿主进行机械性的穿透。黑色素还可以抑制多种酶对真菌细胞壁的溶解。