摘 要

雪落樱（Cerasus xueluoensis）是具有极高观赏价值的灌木型野生樱花资源，研究其快繁技术体系具有重要的实际意义。本文探索了消毒剂类型、消毒时间、培养基类型、不同激素浓度及其组合等因素对雪落樱茎段不定芽诱导的研究，试图建立完整的再生体系。初步研究结果如下：外植体先用70%酒精消毒30 s，再用0.1%HgCl₂溶液消毒7 min时消毒效果最佳，但具体消毒时间要视外植体的成熟程度给予适当的调整，力求获得最佳的消毒效果。比较基本培养基、不同激素浓度及其组合，确定MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基启动效果最佳，MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L培养基对不定芽增殖效果最理想，增殖系数达4.13，较适宜的壮苗培养基为MS 6-BA 0.1 mg/L IBA 0.1 mg/L，生根培养基为3/4MS NAA 0.1 mg/L，生根率最高达98%。生根苗移栽到珍珠岩：河沙：蛭石=1:1:1的基质中成活率较高。

关键词：雪落樱；组织培养；灭菌；激素；

Study on Tissue Culture Tcchnique of Cerasus xueluoensis

Abstract

Cerasus xueluoensis is highly ornamental value shrub wild cherry resources and study the propagation technology system has important practical significance. With stem segments of Cerasus xueluoensis as material, through explore the different types of sterilization, sterilization time, types of medium,plant hormones concentration and ratios for induce the Callus and adventitious buds, and try to established a plant regeneration system at last. The results showed that: the best method for sterilization was 70% of ethanol for 30s first, then 0.1% of HgCl₂ for 7min, but we should according to the degree of explants to adjust the sterilization time properly. Compared with the basal medium, plant hormones concentration and ratios, which showed that the optimal induction medium was MS 6-BA 0.1 mg/L NAA 0.1 mg/L, and the optimal proliferation medium was MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/Lwith the buding growth coefficient about 4.13. The best sound seedling medium was MS 6-BA 0.1 mg/L IBA 0.1 mg/L, and the best rooting culture was 3/4MS NAA 0.1 mg/L, with a rooting rate of 98%.

Key words: Cerasus xueluoensis; Tissue Culture; Sterilization; Hormone;

目 录

第一章 文献综述 1

前言 1

1.植物组织培养研究 1

1.1外植体的研究进展 1

1.2培养基的研究进展 1

1.3激素的研究进展 2

2.组织培养研究在樱属植物中的应用 2

2.1樱属植物外植体、培养基及激素的利用 2

2.2樱属植物组织培养过程中的主要问题 3

2.2.1污染 3

2.2.2褐化 4

2.3.3玻璃化 5

3.雪落樱组织培养研究概况 5

4.研究目的与意义 5

第二章 雪落樱组织培养实验 6

1.材料与方法 6

1.1试验材料 6

1.2材料的预处理 6

1.3器械、培养基的准备. 6

1.4研究方法

1.4.1最佳消毒时间和消毒剂的筛选 6

1.4.2诱导培养基的筛选 7

1.4.3丛芽的增殖培养基的筛选 7

1.4.4丛芽壮苗与生根培养基的筛选 8

1.4.5炼苗和移栽 9

1.5评价指标 9

2.结果与分析 9

2.1消毒剂和消毒时间的筛选 9

2.2诱导培养基的筛选 10

2.3丛芽的增殖培养基的筛选 10

2.4丛芽壮苗与生根培养基的筛选 11

2.5炼苗和移栽 12

第三章 结 论 13

致 谢 14

参考文献 15

1. 文献综述

前言

雪落樱是2012王贤荣等在湖北发现的新种^[1]，为蔷薇科（Rosaceae）樱属(Cersus)矮生樱亚属植物，落叶灌木或小乔木，冬季腋芽三枚或两枚并生，中间为叶芽，两侧为花芽。伞形花序着花2-4朵，总梗不明显，花梗长0.6-2.5 cm，花梗紫红色或红绿色，无毛或被疏柔毛，苞片绿色，果期宿存，近于花叶同放。花瓣白色，椭圆形，先端两裂，基部楔形；雄蕊30-40枚，无毛；雌蕊1枚，长约2 cm，明显高于雄蕊。核果紫黑色，椭圆形。

其植株矮小，为少见灌木类樱花，开花繁密，花色变异丰富，具有极大的观赏价值和市场前景，因此，开展其快速繁殖技术的攻关具有十分重要的实际意义。

1植物组织培养研究

植物组织培养是一门基于无菌操作的新型快速繁殖技术，其原理是利用植物细胞全能性对植物的离体器官（茎段、叶片、芽）、组织、细胞以及原生质经行处理并接种到适宜培养基上，给予适宜的环境，使其生长、分化、增殖，最后诱导出新的完整植物体。

如今科学技术不断发展，植物组织培养技术也愈加完善且应用广阔。植物组织培养技术主要用于植物快速繁殖、培育脱毒苗、研发新品种、健全种质资源库、生产次生代谢物几个方面^[2]。而植物快速繁殖技术的应用范围也从观赏植物逐渐扩大到园艺作物、大田作物、药用植物，但大规模产业化生产的主要还是具有经济价值的农产品、花卉等^[3]。其中木本观赏植物由于含有酚类物质较多，组织培养过程中极其容易褐化，经济效益周期长^[4]，导致研究难度相比于花卉等草本植物较大，但经过长期不懈的努力，目前在蔷薇科、木樨科、杨柳科、松科、杉科、鼠李科等当中已经有100多种木本观赏植物能够运用组织培养技术建立完整的再生体系^[5]。

1.1外植体研究进展